微生物鑒定的定義
微生物鑒定是指借助現(xiàn)有的分類系統(tǒng)，通過對未知微生物的特征測定，對其進行細菌、酵母菌和霉菌大類的區(qū)分，或?qū)?、種及菌株水平確定的過程，它是藥品微生物檢驗中的重要環(huán)節(jié)。
微生物鑒定的意義
藥企中，一般會建立潔凈區(qū)微生物數(shù)據(jù)庫，繪制出微生物地圖，為消毒劑的選型、藥品生產(chǎn)過程中微生物污染調(diào)查、溯源提供支持。各國藥典或指南等對檢出微生物的鑒定需要達到的水平也有明確規(guī)定。綜合而言，大多數(shù)非無菌藥品生產(chǎn)過程和部分無菌生產(chǎn)環(huán)境的風險評估中，對所檢出微生物進行菌落形態(tài)學(xué)、細胞形態(tài)學(xué)、染色特征以及生化反應(yīng)進行分析，一般即可滿足需要；對于無菌試驗結(jié)果陽性、無菌生產(chǎn)模擬工藝 (如培養(yǎng)基灌裝)失敗、環(huán)境嚴重異常事件時，對檢出的微生物鑒定至少達到種水平，必要時需達到菌株水平。
近幾年，隨著生物制品的快速發(fā)展，越來越多的研發(fā)型及初具規(guī)模的生產(chǎn)型企業(yè)在細胞建庫、復(fù)蘇、培養(yǎng)過程中也深受微生物污染的困擾，同時由于生物制品原材料成本高、生產(chǎn)培養(yǎng)周期長等特點，一旦染菌，經(jīng)濟以及時間成本都受到損失。雖然所有企業(yè)都會采取避免染菌的控制方式，比如對環(huán)境的清潔以及監(jiān)控、對人員操作的培訓(xùn)等，但這些措施均為通用型的控制手段，不能有針對性的對污染源進行識別并控制。所以通過對所感染的微生物以及可能的污染來源所具有的微生物進行鑒定以及比對，找到污染源，對后續(xù)制定相應(yīng)的糾正及污染控制措施有重要意義。
微生物鑒定的方法
微生物鑒定方法分為表型微生物鑒定和基因型微生物鑒定兩種，兩者均需在鑒定過程中與數(shù)據(jù)庫進行比對以判斷未知菌的信息。其中表型微生物鑒定依據(jù)表型特征的表達來區(qū)分不同微生物間的差異，是經(jīng)典的微生物分類鑒定法，廣泛應(yīng)用于藥品微生物實驗室。在許多質(zhì)量控制調(diào)查中，表型鑒定結(jié)果能給出一定的信息幫助調(diào)查人員進行深入調(diào)查，并按需要制定適宜的糾正措施。基因型微生物鑒定，不受生長培養(yǎng)基或分離物活性的影響，只需分離到純菌落便可用于分析，通常在無菌檢查試驗結(jié)果陽性、非無菌藥品控制菌檢查中疑似菌的鑒定、環(huán)境監(jiān)控異常、偏差調(diào)查、培養(yǎng)基模擬灌裝失敗等微生物調(diào)查中使用。
無論是表型微生物鑒定還是基因型微生物鑒定，傳統(tǒng)的鑒定方法步驟相對繁瑣，對人員依賴性較高。隨著近些年技術(shù)的不斷發(fā)展，自動化程度高的設(shè)備的推出為我們微生物鑒定提供了極大的便利。例如梅里埃的VITEK全自動微生物分析系統(tǒng)，將多年手工鑒定的經(jīng)驗應(yīng)用于自動化系統(tǒng)，通過測定菌株碳源利用、氮源利用、產(chǎn)酶活性及耐藥性等生化特征，實現(xiàn)菌株快速鑒定分析。
本公司微生物鑒定平臺，選用VITEK® 2 Compact全自動微生物鑒定儀（見圖1），搭配PREVI® Color Gram Version 2全自動革蘭氏染色儀（見圖2），將分離純化后的菌株進行標準化的自動染色，染色時間少于5分鐘。根據(jù)待檢菌的初篩結(jié)果，選擇相應(yīng)的測試卡對待檢菌進行進一步鑒定。該鑒定系統(tǒng)符合 21 CFR Part 11 標準，測試卡均條碼標記，檢測過程全程溯源，檢測結(jié)果確信度高，檢測快速，一般當日或次日即可得出結(jié)果。例如，在被污染的某細胞培養(yǎng)液中分離純化出的單菌落，經(jīng)革蘭氏染色，確定為革蘭氏陰性桿菌（見圖3），將該菌在鑒定儀中進一步鑒定，確定為少動鞘氨醇單胞菌（Sphingomonas paucimobilis），鑒定過程耗時4.58小時，全程自動化操作，無需人員干預(yù)。
關(guān)于賦成生物
賦成生物是一家聚焦生物大分子藥物的工藝開發(fā)和規(guī)模生產(chǎn)，具有核心客戶和持續(xù)創(chuàng)新能力的國際化CDMO企業(yè)。賦成生物具有生物大分子藥物完整研發(fā)周期各階段的CMC技術(shù)平臺，生產(chǎn)和注冊申報經(jīng)驗，可以承接海外License-in項目國內(nèi)量產(chǎn)和國產(chǎn)抗體藥項目臨床至商業(yè)化階段出海服務(wù)，并為戰(zhàn)略合作伙伴量身定做商業(yè)化生產(chǎn)。賦成生物的管理團隊成員均在生物制藥行業(yè)的專業(yè)領(lǐng)域擁有20年以上行業(yè)經(jīng)驗，擁有卓越的生物大分子藥物研發(fā)、生產(chǎn)、質(zhì)量控制、供應(yīng)鏈和國內(nèi)外注冊經(jīng)驗。公司員工總數(shù)超過150人，核心技術(shù)人員由具有豐富工作經(jīng)驗的科學(xué)家、工程師組成，為客戶提供具有差異化的生物大分子藥物CDMO服務(wù)。
